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本周我们连续分享了土壤微生态研究 前沿 思路，今天继续承接这一主题，给大家提供一些土壤微生态研究中常规取样过程中，土壤样本的采集和处理、取样量和备份样、运输与保存以及提取方法。
1土壤样本的采集和处理、取样量和备份样
示例：Zhou J, Deng Y, Shen L, et al. Temperature mediates continental-scale diversity of microbes in forest soils[J]. Nature communications, 2016, 7.
图注：6 sites → 21 nested samples per site → 9 soil cores per sample
关于取样量：适量取样，100 g不难吧？
关于备份样：鄙人认为需要至少5个重复备份样，不信且看我娓娓道来。
土壤性质测试
样本寄送过程中出现问题，抽提不成功
做个多样性，结果不错
再做个宏基因组，编辑说需要验证一下
再做一个做个宏蛋白或者宏代谢组
oO啦，(*╹▽╹*)！
2土壤样本的运输和保存
样本的运输包括：①取样后运送到实验室；②处理好的样本寄送至测序公司。
土壤微生态的研究者相较于其他（如人体、动物之类）方向的研究者更易遭遇第①种情况，那么我们该如何解决这个问题呢？
带个液氮罐，太危险
带个冰箱，哪来的电
太烦了，不做了，呵呵哒，肯定是不可能的
其实解决的方法非常简单，也有参考文献可寻。通常我们只需要简单备一个冰盒就OK啦！
采集的土壤样本至于无菌的自封袋或者EP管中，然后包埋于冰中即可。
那冰选择有两种：①土豪款：干冰；②平民款：普通冰块。注意事项：冰量一定要足够支撑运送至实验室。
盒子的选择也有两种：①土豪款：特制塑料盒；②平民款：普通泡沫盒；或者还有第③款，欢迎留言。注意事项：盒子一定要密闭遮光。
处理好的样本寄送至测序公司四字真言：干冰寄送。
注意事项：①样本使用抗“揍”（毕竟快递小哥太暴力了）的材料装配；②有钱的时候买个Parafilm（不是我要打广告，是我只见过这个牌子的）的封口膜缠住封口；③干冰量要足。
样本的保存八字真言：液氮速冻，-80℃保存。然而有些研究者很纠结，纠结啥呢？
没有-80冰箱，-70行不行，-20行不行
放液氮罐里行不行
完全没有问题，你开心就好！
如果实在担心可以看看下面这2篇文章：
何方妖孽会影响宝宝的粪便菌群？
室温保存对样本微生物群落的影响有多大？
科研文献告诉你同样处理、同一批的样本室温放置24小时对比较研究的样本影响并不大，当然宝宝们在正常的科研工作中对待自己的样本千万不要这么干哟！
3土壤微生物DNA抽提方法
DNA抽提方法无外乎两种：
①人工抽提；②机器抽提。
①试剂盒抽提；②手工自配试剂抽提。
①自己抽提；②测序公司抽提。
你以为今天的分享到这里就完啦？
不！经过对数百篇文章的整理，其我们赫然发现：恩，试剂盒还是选下面的吧!
材料来源：美吉生物微生态产品开发部
编辑：折耳狗
结语：在此感谢梅花小猪老板赠送的一个大洋，社会了我的佩奇哥！
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