四小名助 特色色谱柱应用介绍之三-碳水化合物分析专用色谱柱原理与使用维护

现在，大家一定对这类色谱柱有一定的好奇，这一期我们一起来了解下它吧~

举个例子

以Thermo的HyperREZ XP碳水化合物分析专用色谱柱为例，HyperREZ XP色谱柱固定相是4% 或 8%低交联的聚苯乙烯/二乙烯基苯（PS/DVB）颗粒表面键合磺酸基团（-SO₃H），从而得到骨架，在此骨架上继续络合不同的离子形成不同类型的填料。络合离子有H⁺、Ca²⁺、Pb²⁺和Na⁺，这些选择性不同的离子与被分析物分子上的羟基相互作用从而进行分离。这类色谱柱在分析过程中由于涉及到离子排阻，离子交换，反相，分子排阻，配体交换等各种作用，因此具有非常好的分离效果。

其最主要的分离选择性来自于聚合物络合的金属离子，金属离子类似于硅胶填料中的键合相，决定着适合分离的化合物类型：

聚合物基质的HyperREZ XP色谱柱与硅胶柱相比，优势是PH范围宽（1-11），并且可以在高温条件下运行，以快速分析并提高某些结构极为相近的化合物分离度。但比起硅胶柱，缺点为不耐压，最大只可承受69bar压力，因此使用时要注意流速，典型流速是0.6ml/min。

实验过程中，色谱柱先用0.1 ml/min 流速，当柱温升至实验温度（如80°C）时， 再提高流速到实验需要的流速0.6ml/min。实验结束后，先将流速下降到0.1 ml/min，关掉柱温箱。很多时候，这类色谱柱使用的流动相是纯水，如果流动相中有酸或其他成分，用100%水冲洗色谱柱20个柱体积。然后取下色谱柱，保存在4°C 冰箱中，以免在常温下色谱柱内长菌。

当色谱柱使用一段时间被样品污染，可以清洗再生。如果是化学污染，可以用含有有机溶剂的流动相（如<30% 乙腈 或<5% 乙醇） 清洗。其他离子污染，H⁺柱可用0.05M硫酸清洗4-16 小时。Ca²⁺、Pb²⁺和Na⁺柱可用0.1M硝酸盐清洗4-16 小时。

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